Анализ крови на туберкулез вместо манту ребенку в инвитро
Можно ли применять ПЦР на туберкулез вместо Манту? - Первый по туберкулезу
Оглавление: [скрыть]
- Полимеразная цепная реакция: особенности метода
- Возможна ли взаимозаменяемость диагностических методов?
Актуальной для родителей проблемой является правомерность и эффективность использования метода ПЦР на туберкулез вместо Манту.
Каждый год туберкулез поражает все большее количество населения, и дети в этом списке не являются исключением. Эффективность лечения напрямую зависит от быстрой и достоверной диагностики, позволяющей определить микобактерии заболевания. Не менее важным является определение наличия латентного (не проявляющегося внешне) туберкулеза, что позволяет вовремя начать профилактическое лечение и предотвратить таким образом активный этап в его течении.
Полимеразная цепная реакция: особенности метода
Традиционно в профилактических целях используется вакцина БЦЖ, а в диагностических — проба Манту. Однако в последнее время в связи с возникающими после процедур осложнениями и неточностью диагностических результатов ставится вопрос о современной, более точной и эффективной альтернативе популярным ранее методам.
Один из прогрессивных методов диагностики туберкулеза — ПЦР. Возникает вопрос, является ли его применение вместо Манту оправданным и правомерным.
Полимеразная цепная реакция (понятие «цепной» реакции в данном контексте употребляется для обозначения серии процессов, связанных продуктом или энергией, которые одновременно являются участниками предыдущего и последующего этапа и приводят к ускорению или поддержанию реакций), открытие которой считается одним из наиболее значимых событий микробиологической науки последнего времени, позволяет ученым имитировать естественное самовоспроизведение ДНК с целью выявления специфических болезнетворных молекул.
Результаты этого доказательного и высокочувствительного метода можно получить уже через 1-2 дня. Для сравнения, результаты распространенного культурального метода с применением тестов готовы минимум через 6 недель, а в среднем процедура длится до 15 недель.
БЦЖ не позволяет определить, в каких случаях речь идет о поствакцинальной аллергии, а в каких — о сенсибилизации организма болезнетворными микобактериями туберкулеза. Культуральный метод не дает возможности отличить дикие штаммы и вакционные (M. bovis и M. bovis BCG соответственно).
Со всеми этими задачами прекрасно справляется ПЦР, однако этот факт не является свидетельством того, что она может быть использована вместо Манту.
Вернуться к оглавлению
Следует обратить внимание на то, что Манту и ПЦР применяются для разных целей, поэтому по поводу взаимозаменяемости этих методов до сих пор продолжаются дискуссии.
Распространено мнение, что полимеразной реакцией выявляются возбудители среди множества микробов, для чего достаточно биологической жидкости (например, крови, мочи либо слюны) в объеме 1 мл. Следует учитывать, что микобактерия может пребывать в клетке или в очажке, тогда в анализируемой жидкости фрагментов ДНК возбудителя не найдется: ПЦР даст отрицательный результат.
При клинически подтвержденном туберкулезе легких, что означает наличие возбудителя в организме ребенка, ПЦР дает положительные результаты в 25-80%, при этом ориентировочно 10% результатов будут ложноположительными.
Становится понятно, что даже при отрицательных результатах ПЦР вполне возможна постановка диагноза туберкулез. Иными словами, полимеразная цепная реакция не может быть рекомендована в качестве самостоятельного метода для диагностики туберкулеза.
Однако вследствие того, что данный способ позволяет определить не антитела, а антиген, его успешно применяют тогда, когда организм ребенка не вырабатывает иммунитета при наличии возбудителя заболевания.
ПЦР незаменима в случаях с диагностикой тяжелых или внелегочных форм туберкулеза, при сопутствующем иммунодефиците.
В таких ситуациях диагноз другими методами не устанавливается.
Эффективность метода ПЦР для выявления микобактерий туберкулеза и определения их видов была доказана в результате исследования (отображено в журнале «Туберкулез и болезни легких» №6 за 2013 год), проведенного в МГНПЦБТ.
Впрочем, проблема связана с тем, что родители, переживая из-за негативных последствий Манту, отказываются от этого вида исследования профилактической пробы и, естественно, сталкиваются с проблемами документации при оформлении детей в учебные учреждения.
При отказе родителей от пробы Манту врач может посоветовать выполнить рентгеновское обследование или диагностическое исследование ПЦР.
1tuberkulez.ru
Анализ крови на туберкулез вместо Манту и другие альтернативы проверки реакции для ребенка
Туберкулез – серьезное инфекционное заболевание, которое может появиться у человека любого возраста. Возбудителем является микобактерия туберкулеза (палочка Коха).
Обязательная иммунизация вакциной БЦЖ новорожденных с последующей ревакцинацией значительно снизила заболеваемость туберкулезом. В настоящее время все чаще встречаются латентные формы болезни, поэтому проблема ранней диагностики не теряет своей актуальности.
Туберкулез передается от больного человека воздушно-капельным путем. У детей младшего возраста превалирует алиментарный путь заражения. Наиболее распространенным и дешевым методом раннего выявления болезни является проведение реакции Манту. Часто применяются и другие, альтернативные способы.
Основной метод профилактического обследования детей на туберкулез – реакция Манту, но при наличии противопоказаний и желании родителей можно провести альтернативные анализыПреимущества и недостатки пробы Манту
Пробой Манту называется метод исследования, при котором туберкулин вводится детям под кожу с внутренней стороны предплечья. Туберкулин не является вакциной, не содержит живую или инактивированную микобактерию туберкулеза.
Специфический иммунный ответ детского организма в виде папулы на коже вызывают продукты жизнедеятельности микобактерий. Проверка и оценка результата введения туберкулина производится через 72 часа, размер папулы измеряется прозрачной линейкой.
Согласно федеральным клиническим рекомендациям Российского общества фтизиатров выделяют несколько типов реакции:
- отрицательная реакция – папулы либо нет, либо ее размер менее 1 мм, ребенок никогда не контактировал с микобактериями туберкулеза;
- сомнительная реакция – до 5 мм в диаметре, не имеет диагностического значения;
- положительная реакция – уплотнение от 5 до 16 мм – первичный контакт с палочкой Коха состоялся, но болезнь не развилась;
- гиперергическая реакция – папула более 17 мм, гнойно-некротическое воспаление и увеличение регионарных лимфоузлов свидетельствуют о заболевании туберкулезом, требуется срочное обращение к врачу-фтизиатру.
Реакция Манту не дает представления о распространенности или локализации процесса. Помимо этого, достаточно велико количество ложноположительных результатов:
- при неправильном уходе за местом инъекции;
- при индивидуальной реакции организма малыша на вещества, содержащиеся в пробе, кроме туберкулина;
- при наличии массивной глистной инвазии.
Противопоказания к проведению Манту
Как и к любому методу диагностики, к проведению реакции Манту у детей имеется ряд противопоказаний:
- наличие серьезных поражений кожи, хронических болезней в момент манифестации, эпилепсии;
- аллергии во время обострения;
- индивидуальная гиперчувствительность к туберкулину;
- с момента выздоровления от последнего острого заболевания, либо после окончания карантинных мероприятий в детской организации, должно пройти не меньше месяца;
- проведение туберкулиновой пробы не рекомендуется в один день с плановой вакцинацией.
Альтернативные методы диагностики туберкулеза
Согласно федеральным клиническим рекомендациям Российского общества фтизиатров, с целью исключения туберкулеза у ребенка возможно использование альтернативных методов обследования. Заменить традиционные проверки могут следующие методики: Диаскинтест, Квантифероновый тест, Т-Спот исследование, обзорная рентгенография органов грудной клетки.
ЧИТАЕМ ТАКЖЕ: как проводится тест на Манту – Диаскинтест?Анализы крови
Общеклинический анализ крови нельзя использовать вместо Манту. При заболевании туберкулезом в ОАК обнаруживается лейкоцитоз (увеличение количества лейкоцитов выше нормы), сдвиг лейкоцитарной формулы влево, увеличение скорости оседания эритроцитов (СОЭ).
ЧИТАЕМ ТАКЖЕ: норма СОЭ в крови у детей по возрастуТакие изменения не являются специфическими для туберкулеза, и происходят при любом воспалительном процессе в организме. Результаты биохимического анализа крови также будут без заметных изменений.
Исследование сыворотки крови способом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для скринингового обнаружения туберкулеза у детей не рекомендуется, поскольку выделить геномные фрагменты (части ДНК) возбудителей из крови возможно только при генерализованном туберкулезном процессе. Метод ПЦР пригоден для диагностических целей – выделения микобактерий туберкулеза в биологических образцах: мокроте, смывных водах бронхов, экссудате плевральной полости, спинномозговой и внутрисуставной жидкости. Использование ПЦР вместо проведения реакции Манту нецелесообразно.
ЧИТАЕМ ТАКЖЕ: через сколько дней можно начинать мочить Манту?Метод иммуноферментного анализа (ИФА) крови также не применяется при скрининге туберкулеза. Способ ИФА основан на обнаружении специфических антител в крови, а при туберкулезе действует другой патогенез иммунного ответа организма – антител в крови мало.
Анализ мочи
Анализ мочи также не является альтернативой туберкулиновым пробам, а лишь помогает в диагностике туберкулезного поражения мочевыводящей системы. В результатах исследования мочи можно обнаружить признаки амилоидных трансформаций только при внелегочных формах туберкулеза (изменения в почках, мочевом пузыре), а ПЦР мочи подтвердит диагноз.
Методика Диаскинтест
На сегодняшний день наибольшей восприимчивостью, избирательностью и минимальным аллергенным действием обладает проба с биопрепаратом «Диаскинтест». Он представляет собой аллерген туберкулезный рекомбинантный (АТР) и предназначается для внутридермального введения.
Методика инъекции и трактовка результатов аналогичны проведению пробы Манту, однако достоверность этого теста значительно выше. Тест считается положительным, если размер постинъекционной папулы превышает 3 мм. Крайне редко встречаются ложноположительные результаты при снижении у обследуемого общего иммунитета во время какого-либо сопутствующего заболевания.
ЧИТАЕМ ТАКЖЕ: фото нормы прививки Манту у ребенкаМетод квантиферонового теста
Для проведения квантиферонового теста придется сдать кровь из вены. Способ QuantiFERON – TB Gold основан на иммуносорбентном анализе определения специфических антител, продуцируемых Т-лимфоцитами, с помощью меченых ферментов.
Квантифероновый метод обладает высокой чувствительностью. Крайне высокая стоимость этого анализа исключает возможность широкого применения.
Т-Спот исследование
Т-спот метод (T-SPOT.TB, спот-реакция) не менее информативен, чем квантифероновый анализ. Главным отличием является определение самих Т-лимфоцитов, которые продуцируют антитела в ответ на внедрение микобактерий. Это исследование позволяет проверить пациентов, подлежащих диагностике, из группы повышенной угрозы по возникновению туберкулезной инфекции (например, ВИЧ-инфицированных).
Рентген грудной клетки
В качестве альтернативы пробы Манту можно провести рентген грудной клетки с последующей консультацией врача-фтизиатраЧИТАЕМ ТАКЖЕ: где сделать рентген грудной клетки ребенку?Согласно Приказу Министерства Здравоохранения РФ № 951 2014 года возможно проведение рентгенологического исследования (обзорной рентгенограммы грудной клетки) для исключения заболевания туберкулезом. Рентгенография или КТ органов грудины также является альтернативой внутрикожным пробам и может использоваться вместо Манту. Однако необходимо помнить, что при использовании рентгенологического обследования организм ребенка получает достаточно вредную лучевую нагрузку.
Какой метод выбрать для ребенка вместо Манту?
Перед поступлением в детское дошкольное учреждение или школу, туберкулез должен быть исключен у абсолютно каждого ребенка согласно действующему законодательству. Основным методом скрининговой диагностики была и остается туберкулинодиагностика.
В федеральных клинических рекомендациях Российского общества фтизиатров четко прописан алгоритм ведения детей, поступающих (посещающих) в образовательные учреждения, в случае отказа от иммунодиагностики. По требованиям санитарно-эпидемиологических правил 3.1.2.3114-13 «Профилактика туберкулеза» дети, туберкулинодиагностика которым не проводилась, допускаются в детскую образовательную организацию при наличии заключения врача-фтизиатра об отсутствии заболевания.
Следует помнить об опасности туберкулеза у детей, а также о том, что до сих пор не изобретен совершенно безопасный и абсолютно достоверный способ его диагностики. Именно поэтому ребенок должен быть обследован на туберкулез, а возможность выбора метода остается за родителями.
vseprorebenka.ru
Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза)
КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.
Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.
В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).
Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).
К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).
Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.
Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:
- Индивидуальная непереносимость туберкулина;
- Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
- Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
- Период карантина в детских коллективах.
У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.
Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции
| Метод исследования | Кожный тест | Кожный тест | Исследование крови |
| Побочные реакции | Возможны | Возможны | Нет |
| Противопоказания | Есть | Есть | Нет |
| Специфичность | Низкая | Высокая | Высокая |
| Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ | Да | Нет | Нет |
| Зависимость от сроков проведения профилактических прививок | Да (не ранее чем через месяц) | Да (не ранее чем через месяц) | Нет |
| Интерпретация результатов | Субъективна | Субъективна | Объективна |
Преимущества КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
- отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
- безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
- интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
- высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).
Показания к назначению КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
- Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
- Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
- Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
- Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
- Обследование иммигрантов.
Пример результата исследования и интерпретация:
| Примечание: Данный тест не дифференцирует латентный и активный туберкулез. В случае положительного результата необходима консультация врача-фтизиатра для определения дальнейшей тактики. Величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный.
Интерпретация результатов QFT: Отрицательный - вероятность инфекции М.tuberculosis complex отсутствует. Положительный - инфекция M.tuberculosis complex вероятна. Сомнительный - в силу чувствительности к TB-антигену. |
Интерпретация результата исследования
|
В этом случае врач принимает решение либо в пользу забора нового образца крови, либо в пользу проведения других медицинских обследований. |
Ложноотрицательные результаты могут быть:
|
Внимание! Интерпретация результатов должна проводиться с учетом клинико-эпидемиологического анамнеза и результатов других диагностических исследований.
Метод исследования: твердофазный иммуноферментный анализ.
Материал для исследования: кровь (специальный комплект из трех пробирок, который используется только для проведения исследования «Квантифероновый тест»).
Срок выполнения исследования: 3-10 рабочих дней.
Подготовка к проведению исследования: забор крови производят утром строго натощак (или не ранее, чем через 8 часов после последнего приема пищи).
В лабораторию CMD доставляются все 3 пробирки, помещенные в пакет «Комплект пробирок для Квантиферонового теста»!
www.cmd-online.ru
ВМЕСТО МАНТУ МОЖНО ДЕЛАТЬ ИНВИТРО ТЕСТ!
21.08.2013Фенол входит в состав раствора для пробы Манту, которая ежегодно делается российским детям. Фенол является известным протоплазматическим ядом, он токсичен для всех без исключения клеток организма. Он подавляет фагоцитоз и, соответственно, первичный иммунный ответ.
Исследования, которые могли бы продемонстрировать безопасность введения фенола, возможности его накопления в детском организме и последствий этого, никогда не проводились. Галина Петровна Червонская на встрече посвященной проблемам вакцинологии рассказала про существующие осложнения на реакцию Манту и Диаскинтест. Она предложила использовать в качестве альтернативы инвитро-тест (in vitro) на определение микобактерий туберкулёза в организме. В отличие от использующихся повсеместно реакции Манту и Диаскинтеста, когда в организм человека вводится масса чужеродных опасных веществ, инвитро-тест безопасен, так как в этом случае ничего не вводится в организм, наоборот, из организма человека лишь берётся слюна (или кровь) для исследования. Этот тест более точный -- микобактерии определяются «от одной штуки до 10». К тому же возможна ложноположительная реакция Манту и Диаскинтеста в случае, если ребёнок вакцинирован в роддоме.
Для плеера требуется установить Flash PlayerДобавить комментарий
antivakcina.org
