Ludmila Tumanova

Анализ пцр как берут


Анализ ПЦР: расшифровка, как берут у мужчин и женщин

Содержание статьи:

Высокоинформативный метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) дает возможность раннего выявления различных генетических и инфекционных болезней, протекающих остро или хронически. Причем выявить их можно еще на том этапе, когда они не проявляют себя никакими симптомами. Чаще всего к анализу ПЦР прибегают для обнаружения инфекций передающихся половым путем (ЗППП, ИППП).

Что такое ПЦР анализ

Анализ ПЦР относится к молекулярному методу диагностики, который основан на многократном увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) возбудителя в любом биологическом материале (мазке из шейки матки, влагалища, уретры, крови, слюны, мокроте и т. д.) и сопоставление его ДНК или РНК с базой данных известных видов возбудителей инфекций. Методика разработана американцем Кэрри Мюллисом в 80-х годах прошлого столетия. В 1993 ученый стал лауреатом Нобелевской премией в области химии. Сегодня исследование ПЦР считается своего рода «золотым стандартом» для диагностирования подавляющего большинства инфекций. Анализ ПЦР повсеместно применяется в медицинской практике для уточнения характера болезни и постановки точного диагноза. Очень часто бывают случаи, когда все известные иммунологические, вирусологические и бактериологические методы не действуют. Тогда ПЦР становится единственным способом, с помощью которого можно выявить активную стадию заболевания.

Преимущества ПЦР-диагностики над другими методами

Методика ПЦР нашла широкое применение в современной медицине благодаря ряду бесспорных преимуществ. Расскажем о них более подробно.

Возможность прямого выявления присутствия возбудителя

Многие из традиционных диагностических методик основаны на определении маркеров – белков, которые являются продуктами жизнедеятельности возбудителя болезни. Такой принцип диагностики может дать только опосредованное подтверждение патологии. Метод ПЦР обеспечивает прямое определение возбудителя, поскольку выявляет специфические участки ДНК патогенных организмов.

Высокая специфичность

Методика ПЦР отличается высокой специфичностью благодаря тому, что позволяет выявлять фрагменты ДНК, характерные только для конкретного инфекционного агента. При использовании иммунологических методов остается вероятность получить ложный результат (ошибки в диагностике связаны с перекрестно-реагирующими антигенами). Что касается ПЦР, то здесь ошибки исключены, поскольку специфичность в данном случае задается нуклеотидной последовательностью праймеров.

Высокая чувствительность

Посредством этого метода определяются даже единичные болезнетворные микроорганизмы. Возбудители инфекций выявляются в организме человека даже тогда, когда другие методы диагностики не проясняют ситуацию (речь идет о различных иммунологических микроскопических и бактериологических способах исследования). Приведем данные для сравнения. Чувствительность микроскопических и иммунологических методов составляет 103-105 клеток, а чувствительность ПЦР – 10-100 клеток в пробе.

Универсальность метода

Методика ПЦР основана на исследовании ДНК патогенных организмов. В процессе исследования определяются фрагменты РНК или ДНК, которые являются специфичными для конкретных возбудителей инфекций. Поскольку все нуклеиновые кислоты имеют сходный химический состав, при лабораторном анализе можно применять унифицированные методики. А это значит, что исследование одной пробы дает возможность выявлять сразу несколько возбудителей.

Быстрое получение результатов

Данная методика не требует выращивания культур возбудителей, на которое уходит довольно много времени. Благодаря применению унифицированной технологии обработки материала и выявления продуктов реакции, а также автоматизированному процессу амплификации вся процедура исследования занимает лишь несколько часов.

Возможность выявления инфекций в латентной форме

Методика ПЦР дает возможность эффективно выполнить доклиническую диагностику (выявление возбудителей до появления симптоматики) и ретроспективную диагностику (определение патогенов после перенесенной болезни). Так, доклиническая диагностика имеет большое значение при обследовании пациента в инкубационном периоде возможного заболевания – после предполагаемого заражения до возникновения первых признаков. Одним из важных преимуществ ПЦР является возможность использования для анализа биологических остатков или архивных материалов. Это дает возможность идентифицировать отцовство и личность. На сегодняшний день методы ПЦР-диагностики продолжают развиваться. Усовершенствуется сама технология проведения анализа, а также появляются новые виды ПЦР. В медицинскую практику внедряются инновационные тест-системы для этой реакции. Благодаря такому быстрому развитию науки стоимость процедуры уменьшается, и теперь обследование ПЦР может применяться для многих категорий пациентов.

Суть метода ПЦР

В основе этого метода диагностики лежит многократное удвоение данного участка РНК или ДНК. Этот процесс реализуется в лаборатории с использованием особых ферментов. В итоге формируется столько участков ДНК (РНК), сколько нужно для визуального исследования. Во время процедуры копируется лишь участок, соответствующий заданным условиям (если он присутствует в изучаемом образце). Биологический материал, которые необходимо исследовать на наличие ДНК или РНК возбудителей помещают в амплификатор. (В зависимости от конкретной ситуации для анализа берут кровь, мочу, слюну, отделяемое из половых органов). Затем к образцам добавляют особые ферменты. Они связываются с РНК или ДНК патогенных микробов, и начинается синтез копий. Копирование представляет собой многоэтапный процесс, протекающий по типу цепной реакции. В результате возможно появление сотен или даже тысяч копий.

На следующем этапе диагностики результаты анализируются и сопоставляются с базой данных возбудителей инфекций. Методика ПЦР не просто дает возможность определить вид патогенного организма, но и позволяет сделать выводы о количестве возбудителей инфекции в человеческом организме. Сегодня применение подобных технологий открывает широкие возможности при исследовании мутаций, сращивания участков ДНК. В современной медицине метод начал применяться для определения отцовства, выявления новых генов и многого другого. Благодаря своей универсальности метод ПЦР нашел широкое применение в урологии, гинекологии, пульмонологии, онкологии, гематологии, фтизиатрии, практике инфекциониста и других областях медицины.

Материал для анализа ПЦР

Для ПЦР диагностики применяются различные биологические среды и жидкости, взятые из организма человека: мокрота, слизь, слюна, моча, кровь, соскоб эпителиальных клеток, ткани плаценты, плевральная жидкость, околоплодная жидкость, сок простаты и др. При диагностике ЗППП (ИППП) анализу подвергаются выделения из мужских и женских половых органов. Для этого выполняют мазок или соскоб из уретры или шейки матки. Также для исследования используют мочу. Для выявления инфекций (герпес, мононуклеоз, ЦМВИ, токсоплазмоз, ВИЧ, гепатиты В и С) на анализ берут кровь. При подозрениях на поражения нервной системы производят забор спинномозговой жидкости. Для пульмонологических исследований используют плевральную жидкость и мокроту. Для выявления внутриутробных инфекций анализу подвергают ткани плаценты и околоплодную жидкость.

ПЦР на ИППП и другие инфекции

Какие инфекции можно выявить с помощью анализа ПЦР

- ВИЧ-инфекция (можно выявить вирус иммунодефицита человека ВИЧ-1). - Вирусные гепатиты А, В, С, G ( РНК-HAV, ДНК-HBV, РНК-HCV, РНК-HGV). - ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз. - Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ). - Цитомегаловирусная инфекция (ДНК-CMV). - Герпетическая инфекция (ДНК- вируса простого герпеса ВПГ 1 и 2 типа). - Туберкулез (микобактерия туберкулеза). - Онкогенные вирусы – папилломавирусная инфекция (вирус папилломы человека (в том числе его онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59). - Боррелиоз, клещевой энцефалит. - Листериоз. - Кандидоз (грибы рода Candida). - Хеликобактерная инфекция (Helicobacter pylori) и другие.

Подготовка и сдача анализа ПЦР

Пациенты, сдавшие материал для проведения ПЦР диагностики, рассчитывают на получение быстрого и точного результата. При этом нужно учесть один важный момент – достоверность диагностики зависит не только от профессионализма специалистов и возможностей медицинской лаборатории. Чтобы исследование было информативным, должен приложить усилия и сам больной. Так, необходимо строго придерживаться всех рекомендаций доктора и тщательно соблюдать правила подготовки к сбору материала. Очень важно не допустить загрязнения биологических образцов, иначе результаты обследования будут искажены.

Подготовка к анализу ПЦР

Подготовка к процедуре не связана особыми сложностями. Достаточно запомнить несколько правил:

- Кровь на анализ ПЦР сдается натощак. Кровь берут из вены обычно с утра стерильной иголкой в специальный контейнер. - В течение суток до забора материала показано половое воздержание при взятие мазка ПЦР на ИППП. - Для анализа мочи на ПЦР берется первая порция, емкость должна быть стерильной.

Как берут анализ ПЦР у мужчин и женщин

Анализ ПЦР берут у мужчин и женщин в прививочном кабинете, это кровь из вены, слюну, мазки из глотки, миндалин, смывы из носоглотки и т.д. Метод забора не отличается. ПЦР на ИППП сдают в женской консультации при гинекологическом осмотре у женщин, это мазки из влагалища, шейки матки, уретры. У мужчин во время посещения андролога или венеролога, это мазок из уретры.
Схемы забора материала на ПЦР

Схема забора материала на ПЦР из носа

Схема забора материала на ПЦР с миндалин

Схема забора материала на ПЦР со слизистой глаз

Схема забора материала на ПЦР со слизистой щеки

Схема забора материала на ПЦР у женщин

Схема забора материала на ПЦР у мужчин

Сколько по времени делается ПЦР

Пациентам не приходится долго ждать результатов ПЦР-обследования. На всю процедуру анализа обычно уходит от нескольких часов (ПЦР в реальном времени) до 2-10 суток. Как правило, результаты анализа на руки пациент получает через 2-5 дней, максимально до 10 дней, это зависит от вида анализа. Дольше всего делается ПЦР-диагностика крови на ВИЧ и гепатиты, а меньше всего мазки и соскобы - 2-3 дня.

Расшифровка ПЦР анализа

Отрицательный результат говорит о том, что на данный момент в биологическом материале не выявляются следы возбудителей инфекции. То есть инфекция, по поводу которой проводилось обследование, отсутствует. Положительный результат говорит об обнаружении следов возбудителя в биологических образцах. Это значит, что в данное время в организме человека присутствует инфекция. Возможны случаи, когда ПЦР дает положительный результат, но активного инфекционного процесса не наблюдается. Речь идет о явлении, которое называют «здоровым носительством». Лечение таким пациентом не требуется, но они должны находиться под постоянным динамическим наблюдением. Такие ситуации характерны для вирусных инфекций: вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), гинитальный герпес, цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ), вирус папилломы человека(ВПЧ), при которых для исследования берутся образцы из местных очагов (соскоб уретры, цервикального канала, слюна). При этом нельзя забывать, что здоровый носитель может передать инфекцию другим людям. Кроме того, не исключена активация инфекционного процесса. В случаях, когда ПЦР дает положительный результат при исследовании крови, это уже нельзя считать носительством. Таким пациентам необходимо специфическое лечение заболевания вызванного обнаруженным возбудителем. Количественные показатели не имеют общих градаций. Их оценивает врач индивидуально для каждой конкретной инфекции. Количественный результат дает возможность определить насколько активна инфекция и выявить стадию процесса.

Достоверность ПЦР-метода

Для оценки эффективности методики есть три критерия:

- Точность – выявление инфекции (или ее отсутствия) с высокой степенью вероятности.

- Специфичность – точность определения конкретного возбудителя.

- Чувствительность – возможность идентификации возбудителя даже при малом количестве генетического материала в биологических образцах.

При использовании метода ПЦР получение ложноположительных результатов практически невозможно (то есть, если возбудитель отсутствует, то положительной проба не будет). Ложноотрицательный результат возможен, но такое происходит довольно редко. Подобные ситуации возникают, если инфекция на момент исследования неактивна. К примеру, хроническая инфекция вне активности или же латентная инфекция.

Анализ ПЦР: видео

Онлайн тесты на простатит, аденому, импотенцию: как ими пользоваться

Прохождение тестов онлайн на специализированных порталах никогда не заменит очную консультацию врача и полноценное обследование, но с помощью тестирования можно подтвердить, что проблема

Подробно Анализ ПЦР: расшифровка, как берут у мужчин и женщин

Высокоинформативный метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) дает возможность раннего выявления различных генетических и инфекционных болезней, протекающих остро или хронически. Причем

Подробно Анализ на ЗППП

Анализы на инфекции, передаваемые половым путем (ЗППП, ИППП), являются необходимой диагностической процедурой для выявления венерических заболеваний, которые обязательно надо лечить

Подробно Анализ секрета простаты

Анализ секрета простаты важный диагностический метод, который позволяет подтвердить такой диагноз, как простатит. В этой статье мы подробно расскажем как он проводится, какая подготовка

Подробно

Справочник

Клиники и врачи

  • Клиники вашего города
  • Врачи вашего города

genitalhealth.ru

Анализ ПЦР: что означает, как проводится, как подготовиться, расшифровка

В современной медицине проведение ПЦР анализа биологических жидкостей организма является высокоточным и информативным. При помощи данного анализа выявляют наличие в организме вирусных и микробных частиц, даже если болезни протекают скрыто и не дают никаких симптомов.

Что значит назначение вам ПЦР анализа? Эта аббревиатура расшифровывается как метод полимеразной цепной реакции – это особый способ проведения лабораторных исследований. При данном методе полученный от пациента биологический материал размещается в специальном аппарате. К исследуемой среде прибавляют набор ферментов-реактивов, которые помогают воспроизводить генетический материал возбудителя (вируса или микроба). При реакции воспроизводится большое количество копий ДНК или РНК, что позволяет идентифицировать путем сравнения с базой данных как вирусную, так и микробную инфекцию.

Что означает результат ПЦР анализа? Если в организме человека имеется возбудитель каких-либо инфекций, даже скрытый, при данном анализе будет выявлено не только его наличие, но и в каком количестве данная инфекция присутствует в теле.

Для анализа на инфекции методом ПЦР можно исследовать все биологические жидкости организма – кровь, моча, слюна, выделения половых органов, слизь горла и носа. Для анализа требуется совсем немного материала, так как если возбудители имеются, за счет воспроизведения их копий, концентрация генетической информации доводится до такой, которая выявит микроб или вирус, и определит его вид. Точность анализа ПЦР очень высока, при помощи данного анализа можно на сегодня определить практически все широко распространенные вирусные, микробные и иные инфекции.

Но, что же чаще всего выявляет анализ ПЦР? К списку инфекций, которые можно выявить данным методом можно отнести инфекционные, в том числе и социально опасные инфекции по типу туберкулеза или гепатитов В и С. Этим же методом можно выявить ВИЧ-инфекцию, хламидийную и уреаплазменную инфекции, микоплазмоз как респираторной системы, так и генитальный. При помощи данного анализа выявляют молочницу, бактериальный вагиноз, трихомониаз. Возможности данного метода позволяют выявлять скрытые инфекции – герпес разных типов, ВПЧ (папилломавирус), а также выявление особого микроба, ответственного за развития язв желудка – хеликобатера.

Сегодня сдать анализ методом ПЦР можно практически в любой частной или государственной лаборатории. Данные виды анализов проводят всем, детям и взрослым. В зависимости от того, какую цель преследует анализ, в зависимости от пола проводятся анализ разного биологического материала.

Так, анализ ПЦР у мужчин проводит по крови или моче, секрету уретры, слизи из глотки или носа, соку простаты или даже сперме. Проведение анализа ПЦР у женщин возможно в крови и моче, влагалищном секрете, выделениях из уретры, слизи носа и глотки.

Очень часто применяют анализ ПЦР при беременности, с его помощью во влагалищном секрете или крови выявляют скрытые инфекции, требующие особого наблюдения в этот период, а иногда и адекватного лечения.

ПЦР как берут анализ

Анализ на инфекции данным методом назначает врач, зачастую сбор материала проводится сразу в кабинете доктора – уролога или гинеколога. Как делается анализ ПЦР?

Исследуемый материал в лаборатории смешивают с реактивами и ждут реакции. При наличии возбудителей, копии их ДНК или РНК размножаются. Выявленные фрагменты генетического материала аппарат сравнивает с базами данных и точно выявляет возбудителя инфекции. Пи необходимости, также указывается и количество возбудителя в тех или иных жидкостях тела. Обычно исследование длится не более 1-2 суток, при необходимости – проводят экспресс-анализы.

Откуда берут анализ ПЦР? Это будет зависеть от того, какие виды возбудителя предполагаются. Если это ВИЧ или гепатиты – берется кровь, если это половые инфекции – берется мазок с уретры или влагалища. При подозрении на мононуклеоз или герпес берут мазок с горла. Также могут использоваться моча, спинномозговая жидкость, отделяемое из ран, мокрота и тд.

Анализ крови ПЦР

Для точных результатов и диагностики инфекций важно сдавать кровь в утренние часы натощак. Анализ крови методом ПЦР способен выявить возбудителей опасных заболеваний – ВИЧ, гепатиты, сифилис. В периоды обострения и активности вируса в крови могут быть выявлены вирусы герпеса, папилломы и некоторые другие.

ПЦР анализ: подготовка

Для абсолютной точности анализа важна правильная к нему подготовка. Проще всего подготовиться к анализу крови, никаких ограничений в диете или активности нет, кровь нужно сдать утром, натощак. Анализ мочи сдают после подмывания гениталий, из средней порции в специальный стерильный контейнер. Анализ ПЦР из половых путей заслуживает особого внимания, поэтому важно знать, как подготовиться. За сутки до обследования запрещается секс, перед исследованием рекомендовано не мочиться. При менструации у женщин, дата анализа переносится на 3-5 дней с момента последних выделений.

Сколько времени делается анализ ПЦР

Анализ в зависимости от возможности лаборатории может готовиться от нескольких часов до нескольких дней. В среднем, сколько дней делается анализ ПЦР? Обычно это одни –двое суток. При экстренной ситуации анализ может быть выполнен в этот же день, через несколько часов.

Расшифровка анализа ПЦР

Данные этого анализа очень точные, в отличие от многих других методов. Что показывает ПЦР анализ? Положительный результат говорит о наличии в организме и отдельных биологических жидкостях того или иного возбудителя. Отрицательный результат указывает на отсутствие инфекции. Результаты ПЦР анализа максимально точны, при нем практически не бывает ложно-положительных или ложно-отрицательных результатов.  Если микроб или вирус есть (даже в очень минимальном количестве), при реакции их ДНК или РНК размножится. Если же возбудителей нет, тогда и реакции просто не будет.

Оцените материал:

спасибо, ваш голос принят

Узнайте себя

detstrana.ru

ПЦР у женщин

В этой статье Вы узнаете, как берут ПЦР у женщин,  как проводится подготовка к ПЦР женщине, и что такое ПЦР тестирование у женщин.

Вы узнаете, как берут кровь на ПЦР у женщин, и, на какие инфекции проверяют мазок.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) у женщин позволяет выявить заболевания, передаваемые половым путем.

С целью обследования методом ПЦР берется мазок из влагалища, шейки матки и цервикального канала у женщин.

Также при необходимости исследуют мазок со слизистой ротовой полости, анального отверстия, мочу, кровь.

На какие инфекции смотрят кровь ПЦР у женщин

Что представляет собой ПЦР?

В специальный аппарат помещают биоматериал, а именно мазки со слизистых оболочек.

Добавляется фермент, который помогает синтезировать копию генетического материала микроорганизма (ДНК или РНК) в несколько этапов.

Результат сравнивают с так называемыми эталонами - существующей информацией о ДНК или РНК известных бактерий и вирусных частиц.

Как берут мазки для ПЦР у женщин?

Мазок берет венеролог или врач-гинеколог, с помощью специального деревянного шпателя, из наружного отверстия уретры, шейки матки и влагалища.

Забор материала - процедура безболезненная и вполне безопасная, осуществляется с помощью стерильного одноразового материала.

kvd-moskva.ru

Что такое ПЦР диагностика: как проводят и для чего

ПЦР мазок позволяет определить наличие возбудителя инфекции в организме человека. Чаще всего исследуют выделения человека на предмет хламидий и иных возбудителей венерических заболеваний, передающихся через половые контакты. Точность диагностики довольно высокая, однако, иногда бывают погрешности в определении ДНК возбудителя. С чем это связано, рассмотрим в статье.

Суть исследования ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) считается одним из надежных способов определения наличия бактерий и вирусов в организме человека. Исследование проводят с помощью биоматериалов — слюны, выделений, крови, мокроты и иных субстанций организма. Взятые на анализ материалы смешивают с реактором, который выявляет наличие чужеродных ДНК в составе выделений человека.

Специальные ферменты провоцируют цепную реакцию роста молекул ДНК микроорганизмов, с помощью которой появляется возможность их обнаружения. Помимо выявления присутствия возбудителя в тканях организма, мазок позволяет установить вид и количество находящихся бактерий.

Преимущество данного метода исследования заключается в возможности обнаружить вирус даже по частичным фрагментам его ДНК в выделениях человека — цепная реакция выстраивает молекулы ДНК полностью. Другими преимуществами ПЦР метода являются:

  • быстрый результат, в сравнении с бактериальным посевом и иными методами, — ответ готов в тот же день после сдачи анализов;
  • возможность исследования любого биоматериала — крови, слюны, выделений из матки и т.д;
  • возможность определения вида вируса, точность диагностики.

Помимо преимуществ, метод имеет и свои недочеты. К ним относится:

  • вероятность неточного результата после курса антибиотиков — анализ обнаружит мертвые структуры бактерий и покажет их наличие в организме;
  • невозможность выявления гарднереллеза — небольшое количество бактерий постоянно присутствует во влагалище;
  • метод не в состоянии определить мутацию вирусов, способность видоизменяться.

Общие правила для сдачи анализов

Чтобы исследование биоматериала было максимально точным, выполняйте данные правила:

  • кровь сдают с утра натощак, за сутки до забора плазмы нельзя кушать сладкое, соленое и пить спиртное;
  • урину сдают рано утром, первую порцию;
  • мазок эпителия слизистых половых органов берут после воздержания от интимных контактов в течение трое суток;
  • мазки не сдают во время критических дней, только на третьи сутки после менструации.

Обычно для исследования микроорганизмов берут биоматериал соответствующих болезни слизистых оболочек и выделений:

  • при заболевании мочеполовой системы — забор урины;
  • при заболевании легких/бронхов — мокроту;
  • ИППП заболевания — исследуют эпителий соответствующих слизистых оболочек;
  • при подозрении на гепатит — исследуют кровь пациента;
  • при диагностике хеликобактерной инфекции — используют биоптаты.

Исследование туберкулеза внутренних органов проводят с помощью полимеразной цепной реакции. Палочки Коха могут поражать не только ткань легких, но и кишечник, кожу, почки и другие внутренние органы.

Диагностика ЖКТ

Заболевания ЖКТ имеют разнообразный характер, но общие симптомы. Эффективность терапии напрямую зависит от точного определения возбудителя. Чтобы выявить наличие инфекции, применяют диагностику полимеразной цепной реакции.

В некоторых случаях проводят ПЦР диагностику каловых масс. Для точности анализа материала необходимо учесть следующие рекомендации:

  • прекратить использование слабительных средств за трое суток до сдачи биоматериала;
  • прекратить прием медикаментов, которые могут повлиять на характеристики каловых масс.

Не следует специально омывать анус перед взятием материала, в том числе, использовать душистые моющие средства. Массу нужно взять стерильной ватной палочкой и положить в контейнер. Недопустимо попадание урины в контейнер, также недопустимо использование клизмы для опорожнения.

Преимущество полимеразной цепной реакции в определении диагноза заболеваний ЖКТ:

  • выявление ДНК гельминта;
  • выявление типа возбудителя;
  • определение наличия вируса даже по одной молекуле ДНК.

Точность диагноза заболевания позволяет назначить эффективный курс терапии для устранения болезни.

ПЦР мазок на ИППП

Как правильно сдать мазок на ИППП (хламидии, микоплазмы, уреаплазмы)? Возбудители половых инфекций относятся к скрытым — они не проявляют себя при других анализах, обнаружить их очень тяжело. Как берут выделения для лабораторной диагностики?

Чтобы получить точность анализа при исследовании, необходимо сдать мазок правильно:

  • ПЦР мазок из уретры берут у мужчин;
  • у женщин мазок на ИППП берут из выделений влагалища, мочевого канальчика или шейки матки;
  • нельзя брать мазок во время критических женских дней;
  • после интенсивного курса антибиотиков следует подождать 3 недели, потом сдавать анализы;
  • перед забором слизи из половых органов нельзя мочиться (после последнего опорожнения должно пройти не менее трех часов);
  • недопустимо использовать душистые моющие средства для подмывания половых органов перед сдачей анализов;
  • более достоверный результат можно получить при заборе выделений перед критическими днями либо сразу после их завершения;
  • недопустимо применять вагинальные свечи или спринцевание в день забора выделений.

Является ли процедура забора болезненной? Не следует опасаться мазка на диагностику — биоматериал берут медицинским зондом в малом объеме без повреждения поверхности слизистой оболочки. После забора выделения помещают в транспортировочную жидкость для хранения.

Важно! Забор слизи из уретры может спровоцировать дискомфорт в течение некоторого времени — жжение при выделении урины.

Половые инфекции

Заболевания, передаваемые при интимных сношениях, держат лидирующее положение среди вирусных инфекций. Опасность бактериально-вирусного поражения половой сферы заключается в осложнениях и возникновении тяжелых форм патологии данных органов.

С помощью ПЦР можно выявить скрытые инфекции, которые протекают бессимптомно. К ним относятся:

Хламидиоз проявляется у мужчин и женщин по-разному. Зараженный мужчина испытывает болезненность при опорожнении, зараженные женщины страдают обильными выделениями и прорывными кровотечениями.

Уреаплазмоз никак не проявляется, находится в «спящей» форме. При отсутствии терапии способен спровоцировать выкидыш у беременных и воспаление уретры у мужчин.

Микоплазмоз — женское заболевание, мужчины лишь переносят инфекцию в момент полового сношения. Микоплазмоз может спровоцировать осложнения в течении беременности, отзывается паховыми болями, вызывает жжение при отходе урины.

Молочница у женщин (кандидоз) проявляет себя обильными выделениями, напоминающими творог. Также характерным признаком кандидоза является зуд и жжение. Молочница может появиться и у мужчин, но чаще — это женское заболевание.

Трихомониаз вызывает отек половых органов и покраснение эпителиального слоя, сильные вагинальные выделения с резким запахом рыбы и крошечные изъязвления на половых губах. У мужчин данный вирус вызывает неприятные ощущения и жжение при выделении урины.

Вирус папилломы человека отличается образованием папиллом небольшого размера на наружных половых органах. Опасность состоит в том, что вирус остается внутри организма даже после курса терапии. В некоторых случаях папилломы могут спровоцировать рак шейки матки.

Герпес

Генитальный герпес имеет две формы проявления — острую и «спящую». Опасность данного заболевания состоит в том, что лечению оно не поддается. При помощи медикаментов вирус переходит в спящую фазу и продолжает находиться в теле человека.

ПЦР мазок на герпес делают следующим образом:

  • мужчинам в уретру вводят ватный тампончик на палочке и круговым движением собирают выделения;
  • у женщин берется эпителий с влагалища, шейки матки или мочеиспускательного канальчика.

Своевременно выявленная инфекция поддается быстрому искоренению. Запущенная инфекция может серьезно подорвать здоровье.

ПЦР при беременности

Анализы на скрытые вирусные инфекции помогают выявить заболевание и предотвратить патологии развития плода. ПЦР мазок при беременности может выявить скрытую инфекцию гепатита, причем, другие методы диагностики не способны справиться с задачей. Анализ выделений организма беременной позволяет выявить наличие скрытых паразитирующих микроорганизмов, которые внешне себя не проявляют.

Герпес при беременности

Данный вирус, раз попав в тело человека, остается там навсегда. Во время снижения иммунной защиты, вирус переходит из спящей фазы в активную. Во время беременности защита иммунитета снижается, поэтому вероятность агрессии герпеса увеличивается.

Чем опасен герпес для беременных? Крайней степенью агрессии вируса является поражение внутренних органов тела. Причем, опасна любая форма герпеса — оральная и генитальная. Анализ крови берут у всех беременных женщин.

Герпес способен проникать через плаценту и поражать плод. Известны случаи самопроизвольного выкидыша, гибели младенца после рождения и преждевременных родов, вызванные активностью герпеса. Малыш может заразиться во время прохождения по родовым путям матери.

Анализ полимеразной цепной реакции способен обнаружить вирус герпеса даже в малых количествах в слизистых оболочках органов, а также установить его вид — оральный/генитальный.

Диагностику на наличие герпеса необходимо проводить в следующих случаях:

  • перед планированием оплодотворения;
  • при предшествующих новому зачатию выкидышах;
  • при наличии высыпаний на наружных половых органах;
  • при определении причин бесплодия.

В случае хронического течения инфекции анализ позволит установить степень опасности заражения вирусом полового партнера.

Цитомегаловирус

Особенно опасной считается цитомегаловирусная инфекция, попавшая в тело матери в первые 10 недель формирования плода. Нередко цитомегаловирус приводит к прерыванию беременности и выкидышу.

Инфицирование в срок от трех месяцев до полугода приводит к различным отклонениям в развитии плода, замедлению роста и дисплазии внутренних органов. Заражение на последних месяцах вынашивания приводит к поражению органов ребенка, которое можно увидеть уже после рождения.

Устранить цитомегаловирусную инфекцию невозможно, однако, сдержать ее активную форму удается с помощью курса терапии. Беременным назначают медикаменты, способствующие укреплению иммунной системы: в этом случае организм сам борется против агрессии вируса.

Передается вирус разными способами:

  • в организм матери вирус попадает при общении с зараженным человеком и во время полового контакта;
  • от матери плоду бактерии передаются через плаценту, в процессе родов и при грудном вскармливании.

Цитомегаловирус может проявить себя через два месяца после проникновения в тело женщины, симптомы похожи за простудное заболевание:

  • гипертермия и озноб;
  • головные боли;
  • бронхит и кашель;
  • боли в мышцах и костях.

Нельзя приписывать расстройство здоровья беременной ее особому состоянию. Нельзя назначать лечение самостоятельно без консультаций с гинекологом. Проявления заболеваний могут носить одинаковый характер, но различную этимологи.

К мерам защиты от цитомегаловируса относится:

  • защищенный секс с постоянным партнером;
  • использование индивидуальной посуды;
  • использование индивидуальных предметов личной гигиены;
  • дозированная физическая нагрузка на организм;
  • сбалансированная диета, прием витаминов;
  • позитивный настрой и прогулки на улице.

ПЦР мазок на цитомегаловирус способен защитить мать и плод от тяжелых последствий развития недуга.

Внутриутробные патологии

С помощью ПЦР диагностики стали доступными исследования внутриутробного развития ребенка. Особую опасность здоровью плода представляет микоплазма и хламидии.

Перед планированием беременности женщина обязана сдать анализы и на другие виды инфекций — краснуха, токсоплазма, гепатит, вирус герпеса. После выявления наличия перечисленных вирусов, необходимо пройти терапевтическое лечение.

Мазок беременной способен дать информацию о наличии урогенитальной инфекции в родовых путях, своевременное устранение которой защитит малыша от заражения.

Забор выделений на мазок производят в любое удобное время при посещении женщиной гинеколога, специальной подготовки для этого не требуется.

После рождения у младенца тоже берут мазок на предмет выявления инфекции. У малышей берут соскоб с задней стенки гортани и слизь с конъюнктивы, мочу или слюну.

Показания к диагностике в первых триместрах беременности:

  • различные виды патологи беременности;
  • подозрение на хроническую форму инфекции;
  • обострение половых инфекций;
  • выявление чувствительности организма к некоторым медикаментам;
  • наличие инфекционного заболевания крови.

Важно! Не следует опасаться сдавать мазок на анализ во время беременности. Процедура забора материала не вредит развитию плода.

Большую опасность представляет не сдача анализов, а не выявленная инфекция, которая может причинить вред здоровью плода. Полимеразная цепная реакция сможет определить наличие скрытой инфекции, которая легко передается плоду через плаценту.

Часто скрытое протекание инфекционного заболевания принимают за общее недомогание беременной, ввязанное с особенностью положения. Важно в первые 12 недель пройти обследование и выявить скрытые патологии. Повторную диагностику проводят уже после назначенного курса терапии.

Что нужно для обследования беременной:

  • не использовать спринцевание и вагинальные суппозитории за три дня до диагностики;
  • не иметь половых контактов за три дня до забора биоматериалов;
  • последнее посещение туалета должно быть не позднее трех часов до забора мазка с шейки матки.

Если на анализ сдается кровь, нельзя употреблять сладкое накануне диагностики. Также запрещен прием любых медицинских препаратов внутрь и снаружи. Однако чаще для исследования проводят забор мазка из шейки матки.

  • Гонал 33%, 3081 голос

    3081 голос 33%

    3081 голос - 33% из всех голосов

  • Клостилбегит 24%, 2267 голосов

    2267 голосов 24%

    2267 голосов - 24% из всех голосов

  • Менопур 16%, 1479 голосов

    1479 голосов 16%

    1479 голосов - 16% из всех голосов

  • Пурегон 15%, 1383 голоса

    1383 голоса 15%

    1383 голоса - 15% из всех голосов

  • Прегнил 9%, 824 голоса

    824 голоса 9%

    824 голоса - 9% из всех голосов

  • Меногон 3%, 282 голоса

    282 голоса 3%

    282 голоса - 3% из всех голосов

borninvitro.ru

Анализ на ПЦР инфекции

Анализ на ПЦР инфекции – один из самых часто используемых методов диагностики венерических заболеваний.

Он имеет ряд преимуществ по сравнению с другими методиками.

Тест очень чувствительный и высокоспецифичный.

Он занимает минимум времени, недорого стоит и может найти ДНК инфекционного агента в любом биоматериале.

Принцип ПЦР анализа

Анализы на инфекции методом ПЦР позволяют обнаружить ДНК или РНК возбудителя в исследуемом материале.

В основе лежит реакция многократного копирования участка ДНК.

После чего он сравнивается с эталоном.

Таким образом, в процессе исследования можно понять, присутствует ли в клиническом материале образец ДНК определенного микроорганизма.

Исследование проводится целенаправленно для выявления определенного участка нуклеиновой кислоты.

Например, если врач берет анализ ПЦР на хламидии, то невозможно случайно выявить в образце трихомонаду.

Потому что лаборант не сравнивает участок генома трихомонады с той ДНК, что содержится в пробе.

Обычно пациента обследуют сразу на несколько инфекций.

Например, взяв мазок из уретры, в нем ищут ДНК хламидии, трихомонады, полового герпеса, гонококка.

На какие инфекции нужно обследовать пациента, врач определяет, исходя из выявленных симптомов, данных анамнеза и других факторов.

ПЦР диагностика половых инфекций

Методика широко применяется в венерологии.

Потому что она позволяет выявить любые виды патогенных микроорганизмов, провоцирующих воспалительный процесс урогенитального тракта.

Для исследования в основном используются:

  • уретральные соскобы;
  • сперма;
  • моча;
  • сок простаты;
  • вагинальные и цервикальные мазки.

Многие инфекционные заболевания могут поражать структуры глаза, глотку, анус.

Поэтому из этих органов тоже берутся мазки.

Некоторые половые инфекции выявляются при помощи ПЦР в крови.

Преимущества диагностики инфекций методом ПЦР в венерологии:

  • возможность выявления заболеваний на ранней стадии;
  • можно диагностировать даже субклинические формы (без выделений и других симптомов);
  • почти не встречаются ошибочные результаты;
  • выявляется точный вид микроорганизма, что облегчает подбор терапии;
  • могут определяться количественные показатели.

Когда анализы ПЦР положительные после заражения

ПЦР диагностика инфекций может применяться для выявления инфекционных заболеваний на ранних стадиях.

Обнаружить вирусную или бактериальную ДНК можно ещё в инкубационном периоде.

Симптомов ещё нет, но выделение возбудителя во внешнюю среду уже есть.

Иногда выявить при помощи ПЦР инфекции можно уже через несколько дней после незащищенного полового акта.

Тем не менее, сдавать анализы сразу не рекомендуется.

Потому что в этот период бактериальных клеток в урогенитальном тракте очень мало.

Они могут не попасть в мазок.

Соответственно, в этом случае не будут обнаружены эти инфекции методом ПЦР.

Чтобы снизить риск ложноотрицательного результата, сдавать анализы желательно:

  • через 2 недели после незащищенного полового контакта;
  • сразу после появления симптомов, если они возникли раньше, чем через 2 недели.

Какие инфекции можно выявить в ПЦР мазке

Для диагностики большинства инфекций берут мазок или соскоб из различных участков тела.

Их берут оттуда, где имеется воспалительный процесс.

Либо данные анамнеза указывают, что инфекция могла попасть в соответствующую область тела.

Например, при наличии в анамнезе анального полового контакта доктор возьмет мазок из ануса.

Если же таких данных нет, ограничится уретральными и вагинальными мазками.

В большинстве случаев инфекции, которые передаются половым путем, первично поражают уретру.

Хотя возможны и другие локализации.

Например, у женщин трихомонада и кандида чаще вызывают воспаление во влагалище.

Хламидия первично поражает шейку матки.

У мужчин кандида или гарднерелла могут инфицировать головку пениса, но при этом не колонизировать уретру.

Герпетическая и папилломавирусная инфекциям может вызвать воспаление где угодно: не только на гениталиях, но и возле них – в паху, на лобке и т.д.

Поэтому в каждом случае врач в индивидуальном порядке решает, откуда взять мазки.

Он учитывает:

  • данные анамнеза – чем болен партнер, от которого могло произойти заражения, какие виды секса практиковала пара;
  • жалобы – где у пациента болит, зудит, откуда появились выделения;
  • данные объективного исследования – доктор смотрит, где располагается сыпь, участки покраснения или отечности.

Например, если при осмотре горла венеролог заметит покраснение, то он может взять мазок для исследования ПЦР на инфекции.

В том числе в случаях, когда пациенты отрицают оральные половые контакты.

Какие инфекции можно сдать в ПЦР крови

Кровь тоже может быть исследована методом ПЦР.

Таким способом выявляются некоторые вирусные инфекции.

В первую очередь к ним относятся:

  • ВИЧ;
  • гепатиты В и С;
  • герпес.

Исследование может проводиться на сифилис.

Но оно информативно только начиная со вторичного периода.

В первичном для обнаружения ДНК бледной трепонемы используют соскоб с первичной сифиломы.

ПЦР мочи на инфекции

Не только мазки, но и моча может быть использована для выявления инфекций.

Правда, не все патогены могут быть обнаружены таким способом.

Вирусы, паразитирующие внутриклеточно, выявляются только в соскобе эпителиальных клеток.

Поэтому, если нужно провериться, к примеру, на вирус папилломы человека, то моча не подходит.

Не используется она также, если очаги воспаления расположены в других участках (не в уретре).

Например, если при трихомониазе у женщин наблюдаются симптомы со стороны влагалища, то у неё берут вагинальный мазок.

То же самое касается хламидиоза, который часто поражает цервикс, и при этом может не обнаруживаться в уретре.

Нежелательно исследовать мочу на кандидоз, особенно если основная область поражения у мужчин – головка, а у женщин – влагалище.

Кроме того, мочу не всегда целесообразно использовать при необходимости получения количественных показателей (концентрация копий ДНК).

Но в ряде случаев моча вполне подходит как материал для диагностики.

В этом клиническом материале при помощи ПЦР могут обнаруживаться ряд инфекций:

  • хламидия;
  • микоплазма;
  • уреаплазма;
  • гарднерелла;
  • гонококк.

Чаще моча исследуется у мужчин, чем у женщин.

Её берут в основном при преобладании симптомов уретрита в клинике инфекции мочеполовой системы.

ПЦР анализы: контроль после лечения

ПЦР используют не только для первичной диагностики венерических инфекций.

Методика также применяется с целью контроля излеченности.

Под ним подразумевается оценка результатов лечения.

Критериями выздоровления пациента являются:

  • устранение клинических симптомов;
  • эрадикация возбудителя или уменьшение его количества до безопасного уровня.

Для подтверждения излеченности анализы обычно сдаются спустя 2-4 недели после завершения курса антибиотикотерапии.

Раньше сдавать анализы нет смысла.

Потому что будет высокая вероятность ложноотрицательных результатов.

После курса антибиотиков количество бактерий, грибков или простейших значительно уменьшается.

Они не всегда могут быть обнаружены.

Бывают и обратные ситуации.

Ложноположительные результаты ПЦР могут быть обусловлены тем, что обнаруживается ДНК погибших микроорганизмов.

Они больше не представляют угрозы.

Тем не менее, все равно определяются, и человек может получить повторно курс терапии, который на самом деле ему не нужен.

Поэтому необходимо выждать необходимый период времени, прежде чем сдать анализы для контроля излеченности.

Как подготовиться к ПЦР мазку и крови

К анализу крови готовиться не нужно.

А вот для сдачи мазка нужна определенная подготовка.

Есть некоторые запреты, которых должен придерживаться человек, если он хочет, чтобы результаты были достоверными.

Эти запреты соблюдаются для того, чтобы не допустить:

  • попадание в урогенитальный тракт бактерий или других микроорганизмов от другого человека;
  • угнетение флоры, результатом чего становится снижение её количества в верхних отделах урогенитального тракта и повышение риска ложноотрицательного анализа ПЦР.

Необходимо за 2 суток до взятия мазка для ПЦР прекратить любые половые контакты.

Не только вагинальные, но и все прочие.

За 2 недели нельзя использовать антибиотики.

За 3 дня нельзя применять любые лекарственные средства местного действия.

И не только лекарства, но и косметику, лубриканты и т.д.

Женщинам запрещено пользоваться тампонами, делать любые интравагинальные процедуры (в том числе диагностические) в течение 2 суток.

Кроме того, анализы не сдаются в период менструаций.

Больно ли сдавать мазок на ПЦР

Некоторые пациенты, особенно мужчины, переживают, что сдавать мазок – это больно.

Действительно, процедура – не из приятных.

Врач помещает внутрь уретры на несколько сантиметров щеточку.

Ею выполняют вращающие движения.

В результате щеточка соскабливает клетки эпителия с поверхности слизистой.

Этот процесс может сопровождаться болевыми ощущениями.

Многие врачи делают процедуру неосторожно, не обращая внимания на её переносимость.

Но в нашей клинике в лечебном процессе главное не только результат.

Мы следим, чтобы диагностические и терапевтические процедуры хорошо переносились пациентами.

Поэтому принимаем необходимые меры, чтобы мазок из уретры был для мужчины безболезненным.

С этой целью мы применяем местную аппликационную анестезию.

Мы наносим специальный крем.

Он содержит в составе анестетики, которые выключают чувствительные нервные окончания на некоторое время.

В результате мужчина ничего не чувствует во время взятия мазка.

Анализ ПЦР на инфекции с количественной оценкой

ПЦР может быть количественной и качественной.

Чаще применяется качественный тест.

Потому что для большинства инфекций вполне достаточно ответа «да или нет», чтобы принять решение о назначении терапии или оценить её эффективность.

То есть, если микроорганизм есть в урогенитальном тракте, то человек болен.

Если его нет – он здоров.

Никаких промежуточных вариантов быть не может.

Это касается многих возбудителей: сифилиса, гонореи, трихомониаза, хламидиоза и т.д.

Их не должно быть в урогенитальном тракте вообще.

Поэтому лечение проводится до тех пор, пока результаты анализов ПЦР на инфекции будут отрицательными.

Но иногда требуются количественные данные.

В ПЦР диагностике инфекций расшифровка концентрации помогает понять:

  • нужно ли пациенту лечение;
  • насколько высока вероятность, что именно этот микроорганизм вызывал появление симптомов;
  • эффективно ли проходит лечение;
  • можно ли прекращать терапию или её нужно продолжать дальше.

Результат измеряется в копиях ДНК.

Считается, что некоторые микроорганизмы становятся патогенными, только если количество их больше 10 в 4 степени.

К ним относятся кандиды, гарднереллы, микоплазмы, уреаплазмы.

Врач может назначить лечение при концентрации ДНК свыше 10 в 4 степени, даже если симптомов воспаления нет.

Если же они есть, терапия назначается и при выявлении патогена в меньших количествах.

Но лишь при условии, что не обнаружены другие бактерии или грибы, способные вызывать аналогичные симптомы.

Количественные показатели также используются для оценки излеченности.

Например, кандид не обязательно уничтожать полностью.

Если их количество уменьшилось до 10 в 3 степени и меньше, при этом симптоматика отсутствует, то лечение прекращают.

Ложноположительный анализ ПЦР

Ложноположительным называется результат ПЦР, при котором у человека обнаруживают инфекцию, если на самом деле её нет.

Встречаются подобные явления достаточно редко.

Это возможно лишь в таких ситуациях:

  • исследуемый материал загрязнен (произошла контаминация);
  • в биоматериале выявляется ДНК бактерий, которые имеют генетическое сходство с искомым возбудителем (например, при гонококковой инфекции в мазке изо рта могут быть выявлены непатогенные нейссерии).

Ложноотрицательный анализ ПЦР

Ложноотрицательным называют такой результат, при которой ПЦР не выявляет инфекцию, которая на самом деле есть в организме.

Встречается это очень редко.

Потому что ПЦР обладает высокой чувствительностью.

Обычно достаточно 100 копий ДНК или даже меньше, чтобы ПЦР дала положительный результат.

Но все же ложноотрицательные анализы встречаются.

Их причины могут быть следующими:

  • мутации – изменения генома микроорганизма (мутантные штаммы встречаются редко);
  • применение антибиотиков до забора мазка;
  • очень низкое количество бактерий в материале (ниже порога чувствительности теста);
  • неправильное взятие мазка (не из зоны воспалительного процесса, там может не оказаться возбудителя).

Отличия ПЦР от ИФА крови

Так как результаты ПЦР могут быть в некоторых случаях неправильными, для их уточнения могут использоваться дополнительные тесты.

Одним из них является ИФА.

Метод основан на определении уровня антител в крови.

Антитела – это иммунные белки, выделяющиеся лимфоцитами в ответ на заражение инфекцией.

Метод сам по себе не обладает высокой достоверностью.

Обычно он лишь дополняет или уточняет результаты ПЦР.

ИФА имеет определенные преимущества.

Они состоят в следующем:

  1. Возможность выявления инфекции, вне зависимости от её локализации.

Не важно, поразила хламидия уретру, глаза или глотку.

В любом случае ИФА покажет положительный результат.

Потому что антитела вырабатываются и попадают в кровь, где и обнаруживаются.

  1. Оценка стадии заболевания.

На основе количества и динамики различных антител можно выявить, давно ли произошло заражения.

А также провести дифференциальную диагностику первичной инфекции от рецидива.

  1. Выявление осложнений половых инфекций.

Например, при кандидозе поверхностном ИФА крови дает отрицательные результаты.

Но если болезнь осложняется, развивается инвазивный кандидоз, то в крови появляются иммуноглобулины.

Анализ ПЦР на 12 инфекций

В нашей клинике можно сдать анализы ПЦР на 12 инфекций по доступной цене. Это комплексное обследование на все часто встречающиеся венерические болезни.

Оно предполагает выявление в мазке:

  • хламидий;
  • гонококков;
  • 2 видов уреаплазм;
  • 2 видов микоплазм;
  • герпеса;
  • трихомонады;
  • гарднереллы;
  • кандиды;
  • папилломавируса;
  • цитомегаловируса.

Это исследование проводится чаще всего при появлении симптомов воспаления урогенитального тракта.

Его также можно делать с профилактической целью людям, которые имеют в течение года более 2 половых партнеров.

Если вам необходимо сдать анализ на ПЦР инфекции, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

onvenerolog.ru

ПЦР у женщин

ПЦР – полимеразная цепная реакция. Это генетический тест. Позволяет в собранном у пациента материале обнаружить ДНК(РНК) или части ДНК(РНК) инфекционного агента или дезоксирибонуклеазу (рибонуклеазу) самого пациента.

Амплификация – копирование коротких фрагментов ДНК микроорганизма. Осуществляется несколько раз в пределах одного температурного цикла в условиях специализированной лаборатории.

Свойства метода ПЦР:

  • высокая точность и чувствительность метода
  • специфичность (выделяют ДНК инфекционного агента, ДНК пациента и других микроорганизмов)
  • универсальность выполнения лабораторного этапа исследования
  • скорость выполнения ПЦР выше, чем при использовании столь же точного культурального метода (от 5 часов до суток)

ПЦР является достаточно точным анализом, используемым при постановке диагноза при любом инфекционном заболевании.

Когда результат трактуется как ложноотрицательный?

Если в крови, моче, мокроте или мазках нет следов возбудителя, так как микроорганизмов в принципе мало, или материал забран с нарушением требований к технике манипуляции. Ложноположительных результатов при выполнении полимеразной цепной реакции не бывает.

ПЦР не зависит от пола пациента, сдававшего данный материал.  Соответственно, по сути, ПЦР у женщин ничем не отличается от ПЦР у мужчин.

Что нужно сдавать на ПЦР

Мазки:

  • из мочеиспускательного канала
  • из прямой кишки
  • со слизистой глаза и нижнего века
  • из цервикального канала
  • из влагалища
  • из зева
  • с поверхности кожных высыпаний и язв

Кровь, секрет предстательной железы, вода, почва, смывы с поверхностей и даже продукты.

Применение ПЦР

  • диагностика заразных заболеваний, в том числе венерических
  • определение генетических заболеваний
  • генотипирование, создание генотипического паспорта
  • анализ ГМО продуктов и качества продуктов питания
  • определение личности
  • установление отцовства

На какие инфекции проверяет мазок на ПЦР

ПЦР чувствительна к любым известным микроорганизмам.

То есть способна выделить ДНК любого возбудителя: бактерии, вирусы, простейшие, грибы.

Список возбудителей, которые выявляются методом ПЦР, совпадает со списком инфекционных агентов, способных вызывать ИППП.

  • сифилис
  • трихомониаз
  • хламидиоз
  • микоплазма и уреаплазма
  • гонорея
  • ВПЧ
  • мягкий шанкр
  • гарднереллез
  • генитальный или иной герпес
  • донованоз
  • цитомегаловирусная инфекция
  • ВИЧ
  • вирусные гепатиты
  • контагиозный моллюск
  • саркома Капоши
  • кандидоз
  • фтириаз
  • чесотка

Когда назначается ПЦР

Имеет значение срок забора материала. Анализ будет информативен уже в продромальном периоде заболевания. В разгар инфекционного процесса результат достигается практически с гарантированной точностью.

Для определения эффективности лечения ПЦР назначают не ранее чем через 30-60 дней по завершении курса антибиотиков.

Технология забора мазка на ПЦР

Для женщин необходима некоторая подготовка к забору мазка, в том числе на ПЦР.

Подготовка к забору мазков:

  • в день забора материала не мыться, не спринцеваться
  • не мочиться минимум за 2 часа до забора
  • мазки не собирают в период менструации и в течение 2 дней после нее
  • накануне не применять антисептические и антибактериальные средства, в том числе местно (свечи, орошение, таблетки, инъекции)
  • антибиотики должны быть приняты курсом, но первое исследование назначают через месяц после последнего приема

Рассмотрим, как именно берут мазок на ПЦР у женщин.  Процедура выполняется врачом-гинекологом, урологом, венерологом или акушеркой при помощи стерильного тампона.

Им проводят по местам забора материала, по кругу, без нажатия:

  • ​мочеиспускательный канал
  • цервикальный канал
  • стенка влагалища
  • ​ампула прямой кишки
  • слизистая глаза и нижнее веко
  • задняя стенка глотки и миндалины

Тампон помещается в стерильную пробирку или им проводится по предметному стеклу с фиксатором. После чего материал доставляется в лабораторию.

Соскоб проводится тем же стерильным тампоном. Только вращательными движениями и с приложением некоторого усилия или специальной «щеткой». Далее щетка или тампон также помещается в стерильную пробирку или ими проводится по предметному стеклу.

Забор мочи на ПЦР осуществляется стерильный контейнер, первые 50 мл, не выделяя средней порции. Далее контейнер закрывается и доставляется в лабораторию.

Забор мокроты на ПЦР проводится в стерильный контейнер. Предварительно пациенту предлагают выпить побольше жидкости.

С утра пациенту предлагают откашляться и отделить мокроту в стерильную посуду. Данное исследование используют для диагностики туберкулеза, хламидиоза и микоплазмоза.

Как берут кровь на ПЦР

Для сдачи крови в процедурную надо явиться натощак, накануне допустим только легкий ужин. При анализе методом ПЦР используется кровь из вены, для чего специальной иглой на вакутейнере производят прокол.

После присоединяют стерильную пробирку с пробкой к другому концу иглы. Под действием градиента давления (вакутейнер создает вакуум между иглой и пробиркой) кровь легко поступает в пробирку.

ПЦР крови на ВИЧ и гепатиты выполняется в реальном времени с определением концентрации ДНК (РНК) в плазме. Это исследование требуется для решения о назначении противовирусной терапии и прогноза степени риска передачи вируса от беременной к плоду.

Какой материал брать на исследование, решает врач исходя из клинической ситуации. Обычно мазки и моча используются для проведения ПЦР при определении возбудителей ЗППП.

Кровь на ПЦР забирается при постановке диагноза герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ и гепатитов, а также токсоплазмоза.

Мазок на ПЦР из зева или, проще говоря, изо рта – при диагностике мононуклеоза и ЗППП: цитомегаловирус, ВПЧ, сифилис.

Мазок из ануса на ПЦР применяется при определении подавляющего большинства ЗППП.

Какие именно возбудители будут разыскиваться при помощи ПЦР – определяет врач- венеролог после осмотра.

Хранение и транспортировка ПЦР анализов

Стерильные емкости и предметные стекла категорически нельзя замораживать. Хранить в помещении не более двух часов, и только в крайних случаях – в холодильнике еще 20 часов. Необходимость обеспечивать температурный режим транспортировке в специальную генетическую лабораторию обуславливает использование термоконтейнеров. В них поддерживается температура от 4 до 8 градусов Цельсия.Поэтому очевидным плюсом медицинской организации является собственная лаборатория, способная выполнить полимеразную цепную реакцию.

Аналитический этап ПЦР диагностики

В лаборатории сперва выделяется ДНК из предоставленного образца.

Далее материал помещается в термостат в микроцентрифужных пробирках с добавлением амплификационной смеси на несколько часов. Для сравнения выполняется контроль с известными ДНК определенных микроорганизмов. Выполняется электрофорез со смесью бромистого этидия и ДНК, что вызывает свечение в ультрафиолетовых лучах.

Электрофорез позволяет разделить продукты амплификации. При положительном результате теста они дают оранжевое свечение в коротком участке светового спектра.

Интерпретация результатов ПЦР анализа

При определении наличия ДНК (РНК) полимеразная цепная реакция считается положительной, и это точно демонстрирует наличие возбудителя.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека и гепатитов В и С используют ПЦР с определением концентрации ДНК (РНК).

Для ДНК высокой считается концентрация 1,0 x 105 копи на такие инфекции как герпес, цитомегаловирус, ВИЧ и гепатиты, а также токсоплазмоз.

Количественная оценка ПЦР или количественный анализ экспрессии генов говорит об их активности. В результате экспрессии генов образуются определенные белки. которые и считаются в рамках количественной ПЦР в реальном времени. По результату этого исследования врач судит об инфекционной нагрузке и активности возбудителей.

При диагностике ИППП используют несколько диагностических исследований. ПЦР позволяет довольно точно определить наличие определённого возбудителя уже в продромальный период развития инфекции.

Когда симптомы больше напоминают простуду, чем конкретное заболевание. Интересно также оценить напряженность иммунного ответа макроорганизма. Для этого назначаются серологические исследования ИФА, РПГА, РИФ и прочие.

Серология показывает, сколько антител и к какому именно антигену сформировалось, какая стадия заболевания наблюдается. Существует понятие «титр антител». То есть их количество, характеризующее напряженность, то есть выраженность иммунитета. Случается, что ответы разных исследований противоречат друг другу.

ПЦР является реакцией проверки, то есть именно по её положительному результату судят о наличии возбудителя. Например, если ПЦР положительна, а мазок на флору отрицательный.

Мы считаем, что в последнем случае в материал просто не попало нужного количества микроорганизмов. Или они не окрасились по разным причинам. Если ПЦР положительна, а серологические пробы отрицательны, то организм человека не вырабатывает иммунного ответа на возбудителя.

Наблюдается состояние иммуносупрессии, что бывает:

  • при ВИЧ
  • при приёме специальных лекарственных препаратов после трансплантации
  • при лечении аутоиммунных заболеваний
  • в период выздоровления после тяжёлой болезни
  • при истощении или тяжелой хронической усталости

Если ПЦР отрицательна, а серологические пробы положительны, то нужно смотреть на фракцию иммуноглобулинов. IgM характерен для острой фазы течения заболевания при первичном заражении.

В такой ситуации врач может повторить забор материала. Или ориентироваться по точному, но длительно выполняемому культуральному методу (посев культуры возбудителя на питательные среды).

Высокий титр Ig A или IgG могут свидетельствовать о хронической инфекции в стадии обострения. А их низкие титры – просто о том, что пациент перенёс данное заболевание. Именно поэтому серологические пробы не используют для контроля эффективности лечения. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка.

Цена анализа зависит от материала, использованного для ПЦР, и колеблется от 350 до 1200 рублей.

При необходимости сдать ПЦР анализы обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

onvenerolog.ru


Смотрите также

Объявление

Если у Вас есть ещё какие-либо интересные материалы (тексты, фото, видео, аудио), связанные с творческой жизнью Людмилы Тумановой, поделитесь ими со всеми нами, её многочисленными поклонниками.

Обращайтесь по адресу: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра. или по телефону: 8-922-56-101-83